基于磁珠的可视化蛋白质芯片检测ABO血型
2014-7-8 21:40:25 点击：
目前临床常规血型检测方法都是基于红细胞的凝集反应来判断血型，因而会受到如冷凝集等非特异性凝集反应的影响。也有研究利用基因芯片和基于荧光的蛋白质微阵列来进行血型判定，一定程度上可以规避血清学方法的弊端，但是操作繁琐、耗时，并且依赖于昂贵的专业仪器。
第三军医大学第一附属医院赵树铭副教授领衔的一项最新研究，将磁珠与蛋白微阵列相结合，结果可通过显微镜甚至肉眼观察，也可经过CCD成像，为进一步构建高通量、自动化、操作简单、价格适宜的血型及血液相关疾病一体化检测方法打好基础。研究结果发表在《检验医学与临床》2014年5月第11卷第10期。
试验选择人免疫球蛋白G（IgG）及磁珠标记的抗人IgG进行琼脂糖浓度、点样浓度、温度和固定时间等实验条件的摸索。根据优化的条件，经过铺片、点样、固定、封闭等程序构建ABO血型检测蛋白质微阵列，加入血液样品进行反应，最后用磁珠标记的抗体进行检测（图1）。
通过条件的优化发现，在1.0%的琼脂糖基片表面（图2），以100 μg/mL 的蛋白质稀释液点样（图3），之后在24°C固定8h（图4），能够得到更优的信号强度。
检测不同稀释度的抗原抗体，正定型效价可达到1:8192，反定型可达到1:4096（图5）。检测14例临床样品，结果样点清晰、肉眼可见（图6），且结果判定与试管法一致性达100%。
该研究成功构建了基于磁珠的血型检测可视化蛋白质微阵列。与传统的玻片法和试管法相比，运用芯片技术进行血型判定具有灵敏度高、标本和试剂用量少、高通量且易于自动化的特点。今后的研究可使用专业设备进行微阵列构建和制作工艺方面的优化，相信可以使芯片在灵敏度和样点均一性方面得到提高，为进一步构建血型及血液相关疾病一体化检测方法打好基础。
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